martes, 18 de mayo de 2010

ACTIVIDAD ENZIMATICA



Realizada por:ABIGAIL AZURY CONSUELO BLANCAS
Las proteínas realizan múltiples funciones en los seres vivos, contracción, transporte, regulación, sostén, defensa etc.

Las proteínas especializadas en la función catalítica reciben el nombre de enzimas y las sustancias sobre las cuales actúan se denomina sustratos.

Lo que distingue a las enzimas de las demás proteínas es precisamente que, una vez producido el reconocimiento molecular del sustrato, se realiza la transformación de la sustancia reconocida, o sea, como consecuencia de diferentes interacciones entre la proteína enzimàtica y su sustrato este experimenta un reordenamiento de sus elementos constituyentes debido a la ruptura y formación de algunos enlaces químicos. La que resulta de la acción de la enzima sobre el sustrato recibe el nombre de producto.

La existencia del complejo enzima-sustrato y la característica de que la mayoría de los sustratos presentan un tamaño varias veces menor que la estructura de la enzima, implica que la enzima solo entra en contacto con el sustrato en una pequeña zona específica de su voluminosa estructura.

Las proteínas enzimàticas presentan dos regiones o sitios importantes, uno de ellos reconoce y liga al sustrato ( sitio de reconocimiento) y el otro cataliza la reacción ( sitio catalítico) toda vez que el sustrato se ha unido. Estos dos sitios están adyacentes uno al otro en la forma activa de la enzima y en ocasiones, el sitio catalítico es parte del de reconocimiento, estas dos regiones en conjunto reciben el nombre de centro activo.

De lo estudiado hasta el momento sobre las enzimas podemos concluir que estas poseen dos propiedades fundamentales, derivándose estas de las características del centro activo:

Gran eficiencia catalítica.
Elevada especificidad.
Siendo esta ultima la que sirve de fundamento para establecer la clasificación y nomenclatura de las enzimas.

Se han establecido 6 grupos principales:

1 Oxidoreductasas: Enzimas que catalizan reacciones de oxidoreduccion.

2 Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupoquímico entre un donante y un aceptor, se excluyen aquellas que transfieren electrones o sus equivalentes, pues pertenecen a la claseanterior y aquellas en que el aceptor del grupo es el agua y pertenece a la clase siguiente.

3 Idrolasas: Catalizan la ruptura de enlaces químicos con la participación de las moléculas de agua.

4 Liasas: Catalizan reacciones en las cuales se produce la adición o sustracción de grupos químicos a dobles enlaces.

5 Isomerasas: Catalizan la interconversiòn de dos isómeros.

6 Ligasas: Catalizan la unión covalente de dos sustratos mediante la energía de hidrólisis de nucleòsidos trifosfatados, generalmente el ATP.

La practica realizada en la clase del submodulo III consistio en la observacion presisamente de la antes mencionada actividad enzimatica y los pasos a seguir fueron los siguientes:
1._la preparacion de la levadura fu colocar 1gr de levadura en 100ml de agua hasta disolverla.
2._ Tomamos de esta muestra para llenar tres cuartas partes de 4 tubos de ensaye
3._pesamos 5gr de glucosa y 5 gr de dextrosa colocamos los tubos a baño maria cuidando que la temperatura no rebasara los 37°c
4._colocamos una pequeña porcion de cada tubo en los portaobjetos a uno y le agregamos azul algodon mientras que al otro azul de metileno y observamos al microscopio.
5._Pudimos observar el movimiento de las enzimas.
6._ en los otros dos tubos colocamos 10gr de glucosa y 10gr de sacarosa respectivamente y repetimos el paso 4 y nos dimos cuenta que nuestras enzimas estaban saturadas por que dejaron de tener actividad de movimiento.
Con esta practica podemos concluir que a cierta concentracion de azucares las enzimas pierden su movimiento.

LA competencia adquirida en esta practica fue comprobar que a cierto grado de concentracion de azucares la enzimas pierden movimiento.

miércoles, 12 de mayo de 2010

Estandarizaciòn de Soluciones Normales

Por: Marco Antonio Diaz Gonzalez

Objetivo: que el alumno aprenda a aforar y posteriormente observar que vire con el carbonato de sodio, el hidróxido de sodio y el acido clorhídrico


Material:

  • 1 piceta
  • 2 matraz erlenmeyer
  • 1 pipeta
  • 1 probeta
  • 2 vasos de precipitados
  • 1 bureta
  • 1 pinzas para bureta
  • 1 pinzas doble nuez
  • 1 perilla
  • 2 matraces aforados
  • 1 soporte universal
  • 1 balanza granataria
  • 1 vidrio de reloj

Procedimiento:

1.- Armar el soporte universal con la bureta

2.- Pesar .4 gramos de hidróxido de sodio

3.-Vaciar el hidróxido de sodio en un matraz aforado y disolver

4.- Pesar .6 gramos de acido oxálico

5.- Vaciar el acido oxálico en un matraz aforado y disolver

6.-Pipetear 10ml de HCL en el matraz erlenmeyer y valorar

7.-Pipetear 10ml de NaOH EN EL MATRAZ ERLENMEYER Y AFORAR

8.-. Agregar

HCL-Na2CO3 PIPETEAR 10 ML. MAS 2 GOTAS DE NARANJA DE METILO Y AFORAR

NaOH-H2C2O4-2H2O PIPETEAR 10 ML MAS 2 GOTAS DE FENOFTALEINA Y AFORAR

N= G . soluto

(p.e.q) (l)

HCL= 1 + 35.5= 36.5 – 36.5 g/mol

Na2CO3= 23 (2) +12 +16 (3) =106 – 53 G/MOL

NaOH= 23 +16 +1 =40 – 40 G/MOL

N2C2O4=2H2O= 126.07 – 63.035 G/MOL

HCL= N G.SOLUTO/P.E.Q(1)= G.SOLUTO=(N)(P.E.Q)(L)

D=M/V V=M/D = 0.36G/1.180

= (0.1MOL) (36.5) (0.1)

R=0.36G

NaCO3 =G.SOLUTO (N) (P.E.Q) (1)

=(0.1)(53G/MOL)(0.1L)

R=0.53

N2OH=G.SOLUTO (N)(P.E.Q)(L)

=(0.1N)(40G MOL)(0.1L)

R=0.4G/L

H2C2O4 – 2H2O G.SOLUTO(N)(P.E.Q)(L)

=(0.1N)(63.035)G/MOL)(0.1L) R=0.63G/L

AFORAR

HCL-Na2CO3 PIPETEAR 10 ML. MAS 2 GOTAS DE NARANJA DE METILO Y AFORAR = VIRE ROSA

SE VALORO CON 10.6= VIRE AMARILLO CLARO

NaOH-H2C2O4-2H2O PIPETEAR 10 ML MAS 2 GOTAS DE FENOFTALEINA Y AFORAR= VIRE ROSA

SE VALORO CON 12.5= VIRE TRANSPARENTE


lunes, 22 de marzo de 2010

Técnicas Microbiológicas




Por: Laura Nelly Quirino Diego


Submodulo II - Práctica No. 2

Objetivo: Observar e identificatar la morfologaía de algunos hongos por medio de una tinción simple.


Introducción:

Morfología de Hongos y Tinción Simple

Los hongos que producen micosis en el ser humano se encuentran en dos estados morfólogicos básicos: mohos y levaduras.

MOHOS: Hongo multicelular. Su estructura filamentosa se desarrolla a través del crecimiento continuo de una propágula. El elemento tubular que emerge se denomina "hifa". El conjunto y las distintas ramificaciones de las hifas se denomina "micelio" o "thallus". Las "hifas" pueden introducirse en el sustrato formando un micelio vegetativo o proyectarse hacia el exterior constituyendo el micelio aéreo, que es el que define aspecto y morfología de la colonia, pudiendo ser: algodonoso, plumoso, lanudo, velloso, sedoso, brillante, mate, arrugado, plegado, plano, acuminado, extendido, desparramado, circunscrito, membranoso, cerebriforme, pigmentado o no, etc... En este micelio se producen elementos de propagación o propágulas que pueden ser: esporas, conidios, fragmentos de micelio, esclerocio, etc... Existe un grupo que merece destacarse por su frecuencia y tipo de patología, los Dermatofitos. Estos poseen enzimas proteolíticos capaces de digerir la queratina de la que se alimentan, por tanto van a localizarse en zonas muy superficiales como la piel, uña y pelos produciendo micosis superficiales llamadas Dermatofitosis o "Tiñas" (tineas). Los más representativos son Epidermophyton, Microsporum y Trichophyton.
LEVADURAS: Hongo unicelular, redondo o elipsoidal que se reproduce por gemación o fisión binaria. La gemación es la protrusión externa de parte del protoplasma materno (gema o yema), que va creciendo progresivamente, hasta que se desprende produciendo un nuevo individuo. Cada uno de estos elementos se denomina blastosporo y a este tipo de división blastospórica. La célula progenitora queda con las cicatrices de las distintas gemaciones. Es frecuente que exista el fenómeno del "dimorfismo". Esto es, que una levadura forma parte de la evolución morfológica de un hongo filamentoso y al revés. Una levadura que fuese capaz de producir hifas, sería un hongo dimórfico. Las colonias que crecen en un sustrato pueden ser cremosas o mucoides, lisas o plegadas, limitadas circulares, blancas o rojas.El prototipo es la Candida y a diferencia de los anteriores son mas agresivas y difunden mejor por lo que pueden localizarse en partes mas profundas, como las mucosas. Producen las micosis intermedias o candidiasis.

Tinción Simple
Se utiliza un solo colorante, por lo que todas las estructuras celulares se tiñen con la misma tonalidad (Tinta china, Azul Metileno de Loeffler, Azul de lactofenol).
El Hidróxido de potasio al 10% (solución de KOH) permite ver elementos de hongos ya que el KOH digiere parcialmente los componentes proteicos, por ejemplo de la célula huésped, pero no actúa sobre los polisacáridos de las paredes celulares de los hongos.
La tinta china o Nigrosina permite observar células levaduriformes capsuladas (Cryptococcus), sobre todo en LCR. Los polisacáridos capsulares rechazan la tinta china y la cápsula aparece como un halo claro alrededor de los microorganismos. Azul de metileno de Loeffler puede agregarse a las preparaciones en fresco de heces para observar la presencia de leucocitos.


Materiales:
  • 3 portaobjetos y 3 cubreobjetos
  • Microscopio

  • Asa inocular
  • Mechero bunsen

  • Pizeta

  • Muestras de materia orgánica en descomposición

Reactivos:

  • Violeta de genciana

  • Azul de metileno

  • Fucsina finicada

Procedimiento:

  1. Se esteriliza el asa inocular a la flama del mechero hasta que se encuentre al rojo vivo.

  2. Una vez enfriada el asa, se hace la recolección del hongo de las repesctivas muestras de alimentos en descomposición.

  3. Se fija en el cubreobjetos con un gota de agua, la cual despues es secada cerca de la flama del mechero cuidando que no entre en contacto directo con esta y no aumente su temperatura más de lo necesario.

  4. Se coloca una gota de indicador a la muestra y se observa al microscopio.

  5. Repetir el procedimiento con los demás hongos.

Observaciones:

  • Con la ayuda del microscopio se pudo observar la morfología filamentosa de los hongos, con el colorante correspondiente:

- Hongo de hoja de tomate (Violeta de genciana)

- Hongo de chile (Fucsina finicada)

- Hongo de jitomate (Azul de metileno)



Fuentes de Información

http://www.canesten.bayer.es/curso/micolo_21.htm










domingo, 21 de marzo de 2010

Reaciones de Precipitado


POR: BRACAMONTES FERNANDEZ NICOLAS



EQUIPO: 2



REPORTE DE PRACTICA:



OBJETIVO:
Que el alumno identifique los mecanismos del precipitado.



MATERIAL:
· 2 Vasos de p.p.
· 6 Tubos de ensayo
· 1 Pinzas para tubo de ensayo
· 1 Pipeta de un ml.
· 1 Crisol
· 1 Embudo de filtración



REACTIVOS:
· Nitrato de plomo al 5%
· Nitrato de cobre al 5%
· Cloruro de sodio al 5%
· Sulfato de sodio al 5%
· Cromato de potasio al 5%
· Yoduro de potasio al 5%
· Ferrocianuro de potasio al 5%



PROCEDIMIENTO:
1.- Tome 5 tubos de ensayo y etiquételos del 1 al 5, colócalos en la gradilla
2.- En cada tubo verter 0.5 ml. De PbNO3 , a cada tubo agréguele un vol. de 1ml. de los reactivos indicados en la tabla 1.
3.- Escriba y balance las reacciones de los p.p. en la tabla 2.
4.- Repita los procedimientos de los incisos anteriores con las demás soluciones (Fe, Cu)
5.- En un vaso de pp. Colocar 5 ml. de PbNO3 mézclelo con 2 ml. de KI.
6.- Al p.p. formado fíltrelo y por medio del método de peso constante obtenga el peso del filtrado



REACCIONES:



Pb(NO3)2 + :
2 NaCl + Pb(NO3)2 --------- 2Na(NO3) + PbCl2
Na2SO4 + Pb(NO3)2 -------- Na(NO3) + Pb2(SO4)2
2KI + Pb(NO3)2 --------- 2K(NO3) + PbI2
2K2CrO4 + 2Pb(NO3)2 ---------- 4K(NO3) + Pb2(CrO4)2
2K4Fe(CN)6 + 4Pb(NO3)2 ---------- 8KNO3 + Pb4[Fe(CN)6]2



FeCl2 +:
NaCl + FeCl2 ---------- NaCl + FeCl2
2Na2SO4 + 2FeCl2 ----------- 4NaCl + Fe2(SO4)2
2Ki + FeCl2 ---------- 2KCl + FeI2
2K2CrO4 + 2ClFe2 ----------- 4KCl + Fe2(CrO4)2
4K4Fe(CN)6 + 4FeCl3 ---------- 16KCl + 8Fe(CN)6



Cu(NO3)2 +:
2K4Fe (CN)6 + 4Cu(NO3)2 ----------- 8KNO3 + Cu4 [Fe(CN)6]2
2NaCl + Cu(NO3)2 --------- 2NaNO3 + CuCl2
2Na2SO4 + 2Cu(NO3)2 ---------- 4Na(NO3) + Cu(SO4)2
2KI + Cu(NO3)2 ---------- 2KNO3 + CuI2
2K2Cr4 + 2Cu(NO3)2 ---------- 4KNO3 + Cu2(CrO4)2



PRECIPITADO:
Un precipitado es el sólido que se produce en una disolución por efecto de una reacción química o bioquímica. A este proceso se le llama precipitación. Dicha precipitación puede ocurrir cuando una sustancia insoluble se forma en la disolución debido a una reacción química o a que la disolución ha sido sobresaturada por algún compuesto, esto es, que no acepta más soluto y que al no poder ser disuelto, dicho soluto forma el precipitado.
En la mayoría de los casos, el precipitado (el sólido formado) cae al fondo de la disolución, aunque esto depende de la densidad del precipitado: si el precipitado es más denso que el resto de la disolución, cae. Si es menos denso, flota, y si tiene una densidad similar, se queda en suspensión.
El efecto de la precipitación es muy útil en muchas aplicaciones, tanto industriales como científicas, en las que una reacción química produce sólidos que después puedan ser recogidos por diversos métodos, como la filtración, la decantación o por un proceso de centrifugado.
En síntesis, la precipitación es la sustancia solida visible que se forma al combinar varias sustancias.